【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：小鼠白細胞介素33(IL-33)定量檢測試劑盒（ELISA）

英文名稱：Mouse Interleukin 33（IL-33）ELISA KIT

【包裝規(guī)格】

96人份/盒

【預(yù)期用途】

僅供科研使用，定量檢測血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液中小鼠白細胞介素33(IL-33)的濃度。

【檢驗原理】

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)。特異性抗小鼠 IL-33 單克隆抗體預(yù)包被在 高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本和生物素化的檢測抗體，經(jīng)過孵育，樣 本中存在的IL-33與固相抗體和檢測抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入辣根過氧化物酶 標記的鏈霉親和素(streptavidin-HRP)。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺 與樣本中IL-33的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng)，在 450 nm 波長測定 吸光度值。

【主要組成成分】

主要成分

注意：使用前請檢查試劑盒中試劑的標簽和數(shù)量與表格是否一致

需要但未提供的材料及耗材

  1、酶標儀

2、精密移液器及一次性吸頭

3、蒸餾水

4、洗瓶或者自動洗板機

5、37℃水浴鍋或恒溫箱

6、500ml量筒

7、無粉一次性乳膠手套

【儲存條件及有效期】

  1、2-8℃保存，切勿冷凍，有效期6個月。

  2、開封使用后，包被微孔板放入帶有干燥劑的自封袋中，密閉自封袋，并將全部試劑放回2-8℃冰箱。

【結(jié)果計算】

計算標準品和樣本的平均 OD 值，然后減去零濃度標準品的 OD 值。 以標準品濃度為橫坐標，OD 值為縱坐標，用計算機軟件進行回歸擬合生成標準曲線。回歸分 析確定最佳擬合曲線。通過對濃度值和 OD 值取對數(shù)擬合，可以對標準曲線進行線性化。此過程 可能可以得到更多樣本的濃度，但數(shù)據(jù)的準確度會降低一些。

注意：標準曲線最高濃度點的終濃度為 500 pg/ml。如果完全按照說明書的步驟操作 (20 μl 樣本 + 80 μl 檢測緩沖液)，計算樣本濃度時請乘以稀釋因子 5。 如果樣本按照說明書進行了稀釋，最終的稀釋倍數(shù)為 5。如果樣本進行了其它方式的稀釋，計 算樣本濃度時請乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

【檢驗方法的局限性】

1、僅供科研使用，不得用于臨床診斷。

2、在試劑盒標示的有效期內(nèi)使用，過期產(chǎn)品不得使用。

3、跟其他廠家的試劑盒或者組分不能混用。

4、使用試劑盒配套的樣品稀釋液。

5、如果樣本值高于最高標準品濃度值，請將樣本適當稀釋后，再重新測定。

6、待測樣本中存在的人抗鼠等異嗜抗體會干擾檢測結(jié)果，檢測前，請排除該因素。

7、通過其他方法得到的檢測結(jié)果，與本試劑盒測定結(jié)果不具有直接的可比性。

【產(chǎn)品性能指標】

1、物理性能

試劑盒的各液體組分應(yīng)澄清透明、無沉淀或者絮狀物。微孔板鋁箔袋應(yīng)真空包裝，無破損漏氣。

2、劑量反應(yīng)曲線線性

校準品劑量反應(yīng)曲線相關(guān)系數(shù)r值，大于等于0.9900。

3、精密度

批內(nèi)精密度：三組已知的高、中、低濃度樣品，進行二十次在同一個板塊內(nèi)精度評估。批內(nèi)變異系數(shù)CV%小于10%。

批間精密度：三組已知的高、中、低濃度樣品，進行二十次在不同板塊內(nèi)精度評估。批間變異系數(shù)CV%小于15%。

4、檢測范圍

46.88-3000pg/ml 

5、靈敏度

最低檢出劑量小于10.0pg/mL。

6、回收率

三組已知的高、中、低濃度樣品，進行五次回收率評估，回收率在85%-115%之間。

7、特異性

本試劑盒識別天然和重組小鼠白細胞介素33（IL-33），與結(jié)構(gòu)類似物無交叉。

8、穩(wěn)定性

    2℃-8℃保存，有效期6個月。